概述：
免疫熒光技術(shù)（Immunofluorescence technique ）又稱熒光抗體技術(shù)，它是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的原理，先將已知的抗原或抗體標記上熒光基團，再用這種熒光抗體（或抗原）作為探針檢查細胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原（或抗體）。利用熒光顯微鏡可以看見熒光所在的細胞或組織，從而確定抗原或抗體的性質(zhì)和定位。
目的：
測定內(nèi)分泌激素、蛋白質(zhì)、多肽、核酸、神經(jīng)遞質(zhì)、受體、細胞因子、細胞表面抗原、腫瘤標志物、血藥濃度等各種生物活性物質(zhì)。
步驟：
1、細胞準備；
2、固定。根據(jù)需要選擇適當?shù)墓潭▌┕潭毎?，固定完畢后的細胞可置于含疊氮納的PBS中4℃保存3個月；
3、通透。使用交聯(lián)劑（如多聚甲醛）固定后的細胞，一般需要在加入抗體孵育前，對細胞進行通透處理，以保證抗體能夠到達抗原部位。選擇通透劑應(yīng)充分考慮抗原蛋白的性質(zhì)。
4、封閉。使用封閉液對細胞進行封閉。
5、一抗結(jié)合。室溫孵育1h或者4℃過夜。
6、二抗結(jié)合。間接免疫熒光需要使用二抗。
7、封片，熒光顯微鏡檢查
免疫熒光技術(shù)用到的實驗室儀器和設(shè)備：
免疫熒光技術(shù)是一種結(jié)合了免疫化學(xué)和熒光標記技術(shù)的方法，用于在細胞或組織樣本中檢測特定的抗原或抗體。進行免疫熒光實驗通常需要以下實驗室儀器和設(shè)備：
熒光顯微鏡：用于觀察和拍攝熒光標記的樣本。
載玻片和蓋玻片：用于制作樣本切片。
顯微鏡玻片加熱器：用于固定樣本。
孵育箱：用于在特定溫度下孵育樣本和試劑。
離心機：用于離心樣本，如分離細胞或去除多余抗體。
移液器：用于準確量取和轉(zhuǎn)移液體。
吸頭：與移液器配合使用，用于吸取和分配液體。
洗板機：用于自動化洗滌步驟，減少交叉污染。
濕盒：用于在暗環(huán)境中孵育樣本。
顯微鏡載物臺加熱器：用于維持樣本溫度，尤其是在觀察活細胞時。
激光掃描共聚焦顯微鏡（可選）：用于更高級的熒光成像。
pH計：用于調(diào)整和監(jiān)測溶液的pH值。
去離子水系統(tǒng)：用于制備高純度的去離子水。
濾光片：用于選擇特定波長的光。
熒光染料：用于標記抗體或抗原。
抗體和抗原儲存設(shè)備：如冰箱和-80°C超低溫冰箱。
生物安全柜：用于在無菌條件下操作樣本。
熱封膜機：用于封膜顯微鏡玻片。
洗滌瓶和容器：用于存儲和洗滌試劑及樣本。
顯微鏡攝像頭：用于捕捉顯微鏡下的圖像。
圖像分析軟件：用于分析顯微鏡拍攝的圖像。
