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流式細(xì)胞術(shù)(FCM)的優(yōu)勢及應(yīng)用

 更新時(shí)間:2022-11-09 點(diǎn)擊量:1435

流式細(xì)胞術(shù)(FCM)是一種基于激光的技術(shù),用于生物顆粒的多參數(shù)分析。隨著技術(shù)的發(fā)展,F(xiàn)CM已進(jìn)入許多使用領(lǐng)域。FCM也用于免疫表型研究。因此,它可以用于確定細(xì)胞亞群、譜系、細(xì)胞分化和激活階段以及克隆性。隨著FCM分析的發(fā)展,B細(xì)胞發(fā)育和分化的各個(gè)階段已變得可識別。此外,F(xiàn)CM已經(jīng)開始識別和表征幾個(gè)不同B細(xì)胞亞群和相關(guān)診所中的表達(dá)譜。

流式細(xì)胞術(shù)分析血小板功能有較多優(yōu)勢。它可以血小板直接在全血的生理環(huán)境中進(jìn)行分析(包括紅細(xì)胞和白細(xì)胞,兩者都影響血小板活化)。樣本的簡化操作可防止人為的體外活化和血小板亞群的潛在損失。流式細(xì)胞術(shù)方法主要用于檢測血小板表面膜的特異性激活依賴性修飾譜。此外,隨著針對新功能表位的新單克隆抗體的開發(fā),它們比較容易地并入分析中。全血流式細(xì)胞術(shù)可檢測到僅有1%部分活化血小板的亞群,只需微量(~5µL)血液,使用流失細(xì)胞儀還可以準(zhǔn)確分析嚴(yán)重血小板減少癥者的血小板。如果抗體試劑可用,血小板的流式細(xì)胞術(shù)評估同樣適用于動(dòng)物研究。此外,非物種特異性的非抗體試劑(例如,自體配體[FITC纖維蛋白原]、鈣指示劑、F-actin探針[phalloidin]、核苷酸染料[噻唑橙]、活性染料和膜聯(lián)蛋白V)等也常用在動(dòng)物研究中。



流式細(xì)胞術(shù)其實(shí)是一個(gè)平臺,可在此平臺上執(zhí)行數(shù)十種非常不同、高度專業(yè)化的分析,并提供同時(shí)執(zhí)行許多這些分析的能力。正是這種分析的多因素性質(zhì)使FACS成為當(dāng)今免疫生物學(xué)的常用工具。FACS分析得出的數(shù)據(jù)具有較高的信息密度,這對于闡明極其復(fù)雜的免疫系統(tǒng)是可行的。20世紀(jì)以來,F(xiàn)ACS技術(shù)一直在快速發(fā)展。這一演變包括不斷將應(yīng)用程序注入臨床環(huán)境——事實(shí)上,事實(shí)上,幾乎每個(gè)現(xiàn)代醫(yī)院都至少有一個(gè)這樣的儀器,這一事實(shí)已經(jīng)證明了FACS在診斷和預(yù)后方面的作用。目前基礎(chǔ)研究實(shí)驗(yàn)室正在開發(fā)的化驗(yàn),據(jù)推測將在未來十年成為醫(yī)院環(huán)境中的常規(guī)化驗(yàn)。

流式細(xì)胞術(shù)有助于AML亞類化,而無復(fù)發(fā)性細(xì)胞遺傳學(xué)異常。例如,根據(jù)WHO分類(FAB分類下的AML M0),根據(jù)定義,其通過細(xì)胞化學(xué)缺乏髓過氧化物酶反應(yīng)性,依賴于FC建立髓系。在急性粒單核細(xì)胞白血病或急性單核細(xì)胞-單核細(xì)胞性白血病的偶發(fā)病例中,細(xì)胞化學(xué)顯示非特異性酯酶活性很低,F(xiàn)C可以證實(shí)單核細(xì)胞分化。FC鑒定白血病髓母細(xì)胞上的巨核細(xì)胞相關(guān)抗原,如CD9、CD36、CD41和CD61,為診斷急性巨核細(xì)胞白血?。‵AB分類下的AML M7)提供了重要支持,并有助于將其與AML M0區(qū)分開來。

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